PCR檢測試劑盒在使用時(shí)可有什么要領(lǐng)
PCR檢測試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)檢測,可用于檢測各種待檢標(biāo)本(如血液、糞便、食物、生物材料等)中所感染的特定細(xì)菌或病毒的某一特定基因,進(jìn)而確定該細(xì)菌或病毒的感染/污染狀態(tài)。試劑盒中所含引物能特異性擴(kuò)增該細(xì)菌或者病毒的保守區(qū)域,不會交叉擴(kuò)增細(xì)胞基因組。與傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)檢測方法和免疫血清學(xué)檢測方法相比較,本方法更為快速,特異性更高。
PCR檢測試劑盒引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
PCR檢測試劑盒的使用要領(lǐng):
?、匍_始檢測前請仔細(xì)閱讀該產(chǎn)品簡介全文。
?、诓僮鲿r(shí)應(yīng)盡量避免說話,以免引起樣品污染,而造成假陽性。
?、壅麄€(gè)檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。
?、鼙M量使用一次性材料,包括過濾芯吸頭,EP試管,橡膠手套等。
⑤實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組成中的試劑除酶外使用前應(yīng)置4℃提前融化(混勻時(shí)禁止激烈振蕩),酶始終置于-20℃保存。
?、迿z測反應(yīng)管中加入所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免擴(kuò)增冷啟動(dòng)及形成過多的二聚體。
?、弑4?-20℃,保質(zhì)期一年。